該模型的主要評價指標為不同感染期的肺脾肝荷菌量和病變評分值，該模型與國內外報道的經典cornell模型類似，但是cronell模型的問題在于模型潛伏期荷菌量過高，復發期3-9個月后不等。本模型不斷的摸索嘗試克服以上問題，模型均一，參數指標穩定，各感染期的荷菌量值水平合適（不過低也不過高），周期明顯縮短，由3-9個月不等的周期縮短到比較穩定的10周，便于應用。

該模型不僅可以用于潛伏及復發的早期診斷分子的研究，還可以利用潛伏及復發期研究疾病機制，同時可以用于評價潛伏感染的預防性抗生素效果，以及治療性疫苗的效果。

動物模型的制備的設計得到研究所IACUC委員會的批準，人員都是訓練有素的研究人員和實驗人員，全程在ABSL-3實驗室中進行，完全按照模型制備和檢測的一系列SOP操作進行，遵守生物安全操作要求，無安全事故。

1. 感染后動物的臨床癥狀觀察

豚鼠表現為被毛凌亂不規則，飲食欲差等，以高劑量組表現較為明顯。小鼠感染結核菌后主要是在毛發凌亂不規則，活動少，精神狀態、食欲差，以尾靜脈感染組小鼠比較重。

2. 感染后動物體重的變化結果

2.1感染后的豚鼠臟器指數

變化主要表現在脾臟和肺臟，豚鼠在體重下降的同時脾臟在感染后一周內臟器指數沒有明顯的變換，但在一周之后脾臟體重指數不斷升高，最高達到了0.03%。肺臟體重指數是在感染后3天就開始升高，第7天時達到一個峰值，最高達到1%，7天后緩慢下降。變化曲線見圖1、2：

圖1 豚鼠感染結核分支桿菌后脾臟體重指數變化曲線

圖2 豚鼠感染結核分支桿菌后肺臟體重指數變化曲線

3感染后動物病理變化

3.1 豚鼠感染后解剖眼觀病理變化

豚鼠在感染5周時，解剖發現在脾臟、肝臟、肺臟及大網膜上有不同程度突出于臟器表面、粟米大小、灰白色半透明的結核病灶，且脾臟腫大。結果見圖3：

圖3 豚鼠感染結核分支桿菌后解剖眼觀病理變化

A:脾臟；B:肺臟；C:肝臟

3.2豚鼠的組織病理病變

正常對照組的肺臟和脾臟未見明顯病理改變。104CFU、103CFU、102CFU組內均有不同程度 肺組織內血管旁淋巴細胞浸潤，肺組織內肉芽腫，肝臟也有肉芽腫和壞死灶，病變主要集中在脾臟，脾臟肉芽腫、壞死灶和多核細胞。結果見圖3：

圖3 豚鼠病理切片HE染色結果

A:正常肺臟；B:正常脾臟；C:肺組織內血管旁淋巴細胞浸潤C: 脾臟組織內肉芽腫；E\F:肝組織內肉芽腫及壞死灶

4豚鼠組織荷菌量

感染兩周后，104CFU、103CFU、102CFU組的肺、脾、淋巴結中均可培養出結核菌。其中104CFU組在感染1天后上述組織即可培養出結核菌，而103CFU、102CFU組則在感染后7天培養出結核菌。感染5周后脾組織荷菌量見下圖4：

圖4 豚鼠感染結核菌5周后脾組織荷菌量

橫坐標所示：A：102CFU,103CFU，104CFU組；縱坐標所指：log10CFU值。

1實驗用豚鼠的選擇：

選擇體重:300~350gSPF級，雌性Hartley豚鼠（提供廠商：北京維通利華實驗動物技術有限公司）。動物使用申請號:中國醫學科學院實驗動物研究所實驗動物管理委員會（批準號：MC—09-2003）。

2飼養環境

—動物生物安全3級實驗室（ABSL-3）；溫濕度范圍：18-28℃；相對濕度：40-70％；換氣次數：機械送排風；明暗周期：12h/12h；照度：150-300Lux；清潔消毒：用具、籠架等在投入使用前進行消毒；籠具種類及飼育密度：豚鼠籠，3只一籠；

3飼養條件

飼料:中國醫學科學院實驗動物研究所華阜康有限公司豚鼠專用飼料,自由采食；墊料為中國醫學科學院實驗動物研究所華阜康有限公司，定期更換；飲水；普通自來水經過高壓(121℃,30min)，自由飲用。

4觀察

豚鼠在進入ABSL-3實驗室之后，進行檢疫，PPD陰性者，觀察4~5天后，進行感染實驗.

5實驗用豚鼠的分組及感染：

實驗共分為四個大組，第一組為正常對照組(生理鹽水)、第二組為高劑量組（1X10^{4 CFU）、第三組為中劑量組（1X103 CFU）和第四組低劑量組（1X102 CFU）。每組36只均，共144只（5只備用，實際為150只），均采用后肢蹊部皮下注射。}

6感染用菌株

結核分支桿菌標準菌株Dt株（ATCC35810）和結核菌耐藥株（內部編號94789）

7實驗觀察

感染后，每天觀察感染豚鼠的臨床癥狀，每周稱取豚鼠體重，觀察不同感染劑量豚鼠體重和臟器指數的變化規律。

8解剖后病理和荷菌量檢測

分別在感染后1d、2d、3d、5周和6周，每組解剖6只豚鼠，分別無菌活體心臟取血，并在解剖后1/2脾臟、1/2肺臟和1個腹股溝淋巴結，無菌研磨后接種L-J斜面進行結核分支桿菌的分離培養。并將同一組織的剩余部分固定在10%福爾馬林中，進行病理切片。

結核病是由結核分支桿菌（結核菌）引起的一種慢性傳染性疾病，結核感染通常會累及肺、淋巴系統及其它多組織器官。除少數發病急促外，臨床上多呈慢性過程。常有低熱、乏力等全身癥狀和咳嗽、咯血等呼吸系統表現。感染后潛伏期4～8周，其中80%發生在肺部，其他部位（頸淋巴、腦膜、腹膜、腸、皮膚、骨骼）也可繼發感染。

排菌的肺結核患者是傳染源,人與人之間呼吸道傳播是本病傳染的主要方式。大多數的受感染者沒有病癥，稱為潛伏結核感（latentTBinfection），但其中約5-10%的潛伏感染者會發展至活動性結核；若無適當治療，一個活動病例平均每年可使10～15人新受感染，病例本人的死亡率則超過50%。若潛伏感染者同時罹患免疫抑制，如艾滋病，每年就有10%的病發機率。

肺結核病程較復雜，臨床分型有：1、原發型肺結核(Ⅰ型): 肺內滲出病變、淋巴管炎和肺門淋巴結腫大的啞鈴狀改變的原發綜合征。兒童多見，僅表現為肺門和縱隔淋巴結腫大。 2、血型播散型肺結核(Ⅱ型):包括急性血型播散型肺結核及亞急性、慢性血型播散型肺結核。 3、繼發型肺結核(Ⅲ型):可以出現以增殖為主、浸潤為主、干酪病變為主或以空洞為主等多種病理改變。

結核菌進入機體后，被巨噬細胞吞噬，結核菌毒力與宿主免疫力的抗衡決定著結核發病、發展和轉歸。結核病從感染、發病到轉歸均與多數細菌性疾病有顯著不同，宿主反應具有特殊意義，反應分為4期：1.起始期，入侵呼吸道的結核菌被肺泡巨噬細胞吞噬。因菌量、毒力和巨噬細胞非特異性殺菌能力的不同，被吞噬結核菌的命運各異。2.T細胞反應期，由T細胞介導的細胞免疫（CMI）和遲發性過敏反應（DTH）在此期形成，從而對結核病發病、演變及轉歸產生決定性影響。3.共生期，大部分感染者結核菌可以持續存活，細菌與宿主處于共生狀態。纖維包裹的壞死灶干酪樣中央部位被認為是結核桿菌持續存在的主要場所。低氧、低PH和抑制性脂肪酸的存在使細菌不能增殖。宿主的免疫機制亦是抑制細菌增殖的重要因素，倘若免疫損害便可引起受抑制結核菌的重新活動和增殖。4.細胞外增殖和傳播期，固體干酪灶中包含具有生長能力、但不繁殖的結核菌。干酪灶一旦液化便給細菌增殖提供了理想環境。即使免疫功能健全的宿主，從液化干酪灶釋放的大量結核桿菌亦足以突破局部免疫防御機制，引起播散。

結核病的全身癥狀是全身乏力、午后低熱、盜汗、食欲不振、消瘦等；呼吸道癥狀是咳嗽、咳痰、咯血、胸疼、呼吸困難等。其特征性病理改變是肉芽腫病變和結核性結節，其基本病理變化為滲出性病變、增生性病變和壞死性病變。滲出性病變以炎癥細胞、單核細胞肌纖維蛋白為主要成分，增殖性改變以結核結節及結合性肉芽腫為主，壞死的特征性改變為干酪樣改變。結核性炎癥的主要特是上皮樣細胞結節及郎格漢斯細胞。實驗室痰培養為菌陽性，抗酸染色可見細長略彎曲的桿菌，血沉加快。肺的原發病灶、淋巴管炎和肺門淋巴結結核合稱為原發綜合癥，X線影像學上的典型表現為啞鈴狀陰影。感染3-8周后結核菌素皮試轉陽，95%的健康感染者原發綜合征自然消退，成為潛伏感染人群，約5%在日后因潛在感染復燃而發病,結核病起病緩慢，病程較長。