
新鮮的細菌培養(yǎng)物應生長至指數(shù)生長晚期或穩(wěn)定期早期(細菌濃度約為10°個/mL),生長已達穩(wěn)定期晚期的培養(yǎng)物不能使用。試驗中所用的培養(yǎng)物中的活菌度應較高。活菌度可根據(jù)細菌生長曲線的歷史性對照數(shù)據(jù)確定,或在每次試驗時通過滴片測定活菌數(shù)。
GB/T 21786-2008 化學品 細菌回復突變試驗方法
GBZ/T 240.8-2011 化學品毒理學評價程序和試驗方法 第8部分:鼠傷寒沙門氏菌回復突變試驗
在鼠傷寒沙門氏菌或大腸桿菌中檢測需要氨基酸菌株(分別為組氨酸和色氨酸)的突變,以產生一株不依賴外界提供氨基酸的菌株。通過化學品細菌回復突變試驗,可以檢測化學品(有殺菌作用的除外)的致突變性。
健明迪檢測動物毒理試驗中心,提供毒理檢測,可以開展化學品細菌回復突變試驗,報告具有CMA和CNAS資質。
細菌回復突變試驗應用需要氨基酸的鼠傷寒沙門氏菌和大腸桿菌株去檢測由DNA的一個或數(shù)個堿基對的置換、增加或缺失造成的點突變。本試驗的原理是檢測試驗株中存在的回復突變并恢復合成必需氨基酸的能力。
發(fā)生回復突變的細菌能在缺乏特定必需氨基酸的條件下生長,而親代菌株則不能生長,故能檢出。
當營養(yǎng)缺陷型菌株在受試樣品作用下發(fā)生回復突變后,即恢復了合成特定氨基酸的能力,因此可以在不含該氨基酸的培養(yǎng)基上形成菌落,而那些沒有發(fā)生突變的菌株和突變菌株的親代菌株則因無法合成特定氨基酸而不能在不含該氨基酸的培養(yǎng)基上形成菌落。




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